間充質(zhì)無血清培養(yǎng)基是專為間充質(zhì)干細(xì)胞體外擴(kuò)增設(shè)計的高性能培養(yǎng)體系,不含動物血清,成分明確、批次穩(wěn)定,有效避免外源污染與免疫反應(yīng),廣泛應(yīng)用于細(xì)胞治療、再生醫(yī)學(xué)及藥物篩選領(lǐng)域。其核心組分生長因子(如bFGF、EGF)、激素、載體蛋白及抗氧化劑——對溫度、光照、反復(fù)凍融敏感。一旦存放不當(dāng),極易導(dǎo)致活性喪失、pH偏移或微生物滋生,直接影響細(xì)胞貼壁、增殖與干性維持。因此,建立
間充質(zhì)無血清培養(yǎng)基嚴(yán)謹(jǐn)?shù)拇娣乓?guī)范,是保障高活性、低變異、可重復(fù)的關(guān)鍵前提。
一、嚴(yán)格溫控
未開封產(chǎn)品:應(yīng)于–20℃避光冷凍保存,切勿置于–80℃(部分蛋白可能因過度凍結(jié)失活);
已解凍工作液:4℃冷藏,使用周期不超過2周,且避免反復(fù)取出回溫;
禁止室溫長期存放:即使短期(>2小時)暴露于25℃環(huán)境,也可能造成生長因子降解。
二、避光防氧化
所有含培養(yǎng)基的容器(原瓶或分裝管)必須使用鋁箔包裹或存放于棕色瓶/不透光盒中;
bFGF等光敏因子在可見光下數(shù)小時內(nèi)即可失活,操作時盡量在弱光或黃光環(huán)境下進(jìn)行;
若培養(yǎng)基含L-谷氨酰胺替代物(如GlutaMAX),雖較穩(wěn)定,仍需避光以延長有效期。
三、科學(xué)分裝
使用時按單次用量(如50mL)分裝至無菌離心管,避免整瓶反復(fù)凍融(超過2次將顯著降低性能);
分裝體積以3–7天用量為宜,減少開蓋頻次;
解凍后若未用完,不可重新冷凍,應(yīng)于4℃保存并在規(guī)定期限內(nèi)用盡。
四、防污染與密封管理
每次取用前酒精消毒瓶口,使用無菌移液器具;
瓶蓋務(wù)必旋緊,防止空氣中CO?進(jìn)入導(dǎo)致pH下降(尤其碳酸氫鹽緩沖體系);
儲存冰箱專用,不得與抗生素、消毒劑等揮發(fā)性化學(xué)品共存,避免交叉污染。